四種農(nóng)獸藥殘留速測(cè)方法檢測(cè)原理、使用方法、應(yīng)用領(lǐng)域等優(yōu)缺點(diǎn)比較

近年來(lái)，農(nóng)獸藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅速，部分方法已廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管實(shí)際工作，在加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量把控、保障食品安全方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用。目前在國(guó)內(nèi)應(yīng)用較為廣泛的快速檢測(cè)方法包括酶抑制法、膠體金免疫層析法、酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）和快速篩查質(zhì)譜法。

一、酶抑制法

酶抑制法是一種通過(guò)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶活性的抑制效應(yīng)來(lái)間接、快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留的方法。自20世紀(jì)90年代以來(lái)，因其操作簡(jiǎn)便、可同時(shí)檢測(cè)多種農(nóng)藥、成本較低等優(yōu)勢(shì)（單次檢測(cè)成本約2元，配套儀器價(jià)格從數(shù)千到數(shù)萬(wàn)元不等），被廣泛用于基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全日常監(jiān)管和生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)主體自檢。尤其對(duì)于敵敵畏、敵百蟲(chóng)等難以制備抗體的農(nóng)藥，酶抑制法仍具有不可替代的作用。

然而，由于不同企業(yè)產(chǎn)品在酶源、工藝、抗干擾能力等方面存在差異，該方法的靈敏度參差不齊，導(dǎo)致部分禁限用農(nóng)藥存在“檢不準(zhǔn)”的問(wèn)題。根據(jù)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所的評(píng)估，目前能穩(wěn)定滿足限量檢測(cè)要求的農(nóng)藥種類(lèi)有限，主要包括敵敵畏、敵百蟲(chóng)、丙溴磷、滅多威、克百威等。同時(shí)，隨著農(nóng)藥使用結(jié)構(gòu)的變化，酶抑制法對(duì)許多常規(guī)農(nóng)藥無(wú)法檢測(cè)（“檢不了”）的局限性也日益突出。

12通道農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀概述：

12通道農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀采用酶抑制率法，根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 448-2001）和國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局標(biāo)準(zhǔn)（KJ201710）而專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的儀器，蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀其采用酶抑制原理和光電比色法原理研制而成?？煽焖贆z測(cè)出蔬菜、水果、糧食、茶葉以及土壤中有機(jī)磷和氨基甲酸脂類(lèi)農(nóng)藥殘毒。適用于各級(jí)農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心、食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心、市場(chǎng)監(jiān)督管理、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、衛(wèi)生防疫、環(huán)保、蔬菜生產(chǎn)基地、超市、賓館酒店等領(lǐng)域

12通道農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀原理：

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)定410nm下吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留?？梢詫?shí)現(xiàn)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

12通道農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀儀器參數(shù)：

1、★八核處理器、2G內(nèi)存，8G硬盤(pán)、支持藍(lán)牙、wifi、3G通訊模塊

2、★7寸液晶觸摸屏、支持10點(diǎn)觸控。

3、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度（誤差）：±0.2nm（開(kāi)機(jī)自動(dòng)校準(zhǔn)）

4、波長(zhǎng)重復(fù)性：≤0.1nm

5、透射比準(zhǔn)確性：≤±0.5%（T）

6、透射比重復(fù)性：≤0.5%（T）

7、★透射比示值誤差：正負(fù)0.3%

8、光源：固態(tài)高亮度LED光源

9、★通道數(shù)≥12個(gè)

10、★光電流穩(wěn)定度：≤±0.4%/3min

11、雜散光：≤0.01% （T）at360nm

12、光度范圍： 0～4.0A

13、光度準(zhǔn)確度：±0.002A（0～0.5A）±0.004A（0.5～1A）±0.3%T（0～100%T）

14、光度重復(fù)性：0.001A（0～0.5A）0.002A（0.5～1A）

15、基線平直度：±0.001A（190～1100nm）

16、基線漂移:0.0004A/h（410nm）

17、測(cè)量重復(fù)性：≤1.0% 18、反應(yīng)顯色測(cè)試時(shí)間：5秒，1-3min任選（農(nóng)藥殘毒）

二、膠體金免疫層析法

該方法屬于競(jìng)爭(zhēng)性免疫分析技術(shù)，利用樣品中的待測(cè)物與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，競(jìng)爭(zhēng)抑制檢測(cè)線上抗原與抗體的結(jié)合，通過(guò)檢測(cè)線與質(zhì)控線的顯色差異，并借助讀卡設(shè)備或智能手機(jī)進(jìn)行定性或半定量判讀。膠體金法操作簡(jiǎn)便、響應(yīng)快速、靈敏度與準(zhǔn)確性較高，特別適用于農(nóng)產(chǎn)品中常規(guī)農(nóng)藥殘留的現(xiàn)場(chǎng)篩查。目前已有近百種農(nóng)藥的膠體金試紙條投入使用，技術(shù)成熟度較高。原則上，只要可獲得某種農(nóng)藥的特異性抗體，即可開(kāi)發(fā)相應(yīng)試紙條。

但其缺點(diǎn)亦較明顯：一是通常一張?jiān)嚰垪l僅能檢測(cè)一種農(nóng)藥，檢測(cè)通量有限；二是部分農(nóng)藥（如敵敵畏、甲拌磷）因抗體制備難度大，技術(shù)尚未突破；三是檢測(cè)成本相對(duì)較高，單個(gè)試紙條價(jià)格約10–20元，配套讀卡儀價(jià)格在數(shù)千至數(shù)萬(wàn)元。

膠體金免疫層析分析儀概述：

膠體金免疫層析分析儀是基于膠體金免疫層析技術(shù)的原理，通過(guò)反射光譜法測(cè)試CT線強(qiáng)弱程度可以檢測(cè)生化卡、金標(biāo)卡及液態(tài)滴定模塊制成的獸藥、瘦肉精、抗生素、動(dòng)物疫病、重金屬、農(nóng)藥殘留、臨床疫病、水質(zhì)安全、等有毒有害物質(zhì)殘留項(xiàng)目.系統(tǒng)內(nèi)置運(yùn)算處理、判定標(biāo)準(zhǔn)，自動(dòng)精準(zhǔn)判讀檢測(cè)結(jié)果,消除結(jié)果讀取的主觀性，具有準(zhǔn)確、快捷、簡(jiǎn)單、高效的特性。

膠體金免疫層析分析儀特點(diǎn)：

1.七寸彩屏全觸摸輸入，支持手寫(xiě)功能支持WIFI，支持3G、4G；

2.支持金標(biāo)項(xiàng)目檢測(cè)定性檢測(cè)，結(jié)果可顯示樣品陰陽(yáng)性結(jié)果

3.內(nèi)置智能操作系統(tǒng)軟件內(nèi)置大容量存儲(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)，可隨時(shí)分類(lèi)查詢(xún)已測(cè)項(xiàng)目；

4.☆數(shù)據(jù)可局域網(wǎng)和互聯(lián)網(wǎng)數(shù)據(jù)上傳，可構(gòu)建食品安全監(jiān)管系統(tǒng)平臺(tái)，支持LIMS 系統(tǒng)，內(nèi)置USB接口，可擴(kuò)展外設(shè)；

5.☆自動(dòng)精準(zhǔn)識(shí)別CT線位置，糾錯(cuò)范圍可達(dá)±3mm；

6.支持金標(biāo)項(xiàng)目檢測(cè)定性檢測(cè)，結(jié)果可顯示樣品陰陽(yáng)性結(jié)果；

7.檢測(cè)響應(yīng)時(shí)間：<3S；

8.讀數(shù)精度：CV<1% ；

9.12V低壓電源供電，便攜式設(shè)計(jì)，適合野外，車(chē)載或室內(nèi)等各種場(chǎng)所使用；

10.檢測(cè)項(xiàng)目多樣化及開(kāi)放用戶使用市場(chǎng)上不同的膠體金試紙檢測(cè)卡；

膠體金免疫層析分析儀檢測(cè)項(xiàng)目：

1、真菌毒素殘留類(lèi)（食用油、糧食及飼料中黃曲霉毒素B1、液態(tài)奶中黃曲霉毒素M1、食品中嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A等）

2、激素殘留類(lèi)（萊克多巴胺、克倫特羅、沙丁胺醇、己烯雌酚等）

3、水產(chǎn)品安全類(lèi)（呋喃妥因代謝、呋喃西林代謝、呋喃它酮代謝、呋喃唑酮代謝、孔雀石綠、氯霉素）

4、抗生素殘留類(lèi)（磺胺、喹諾酮、喹乙醇等）

5、干式法試紙條食品有毒有害物質(zhì)、非法添加劑類(lèi)、殘留類(lèi)

6、農(nóng)藥殘留類(lèi)

膠體金免疫層析分析儀參數(shù)：

1、屏幕：7寸彩色觸控屏

2、操作系統(tǒng)：ARM嵌入式系統(tǒng)。

3、重復(fù)性：CV＜3%

4、穩(wěn)定性：CV＜3%

5、臺(tái)間差：CV＜3%

6、檢測(cè)通道：?jiǎn)瓮ǖ蓝繖z測(cè)結(jié)果

7、前處理:≤15分鐘（根據(jù)項(xiàng)目而定）

8、檢測(cè)時(shí)間:＜10s可對(duì)樣本進(jìn)行定性、半定量檢測(cè)

9、檢測(cè)結(jié)果報(bào)告：可準(zhǔn)確報(bào)告出檢測(cè)項(xiàng)目、被測(cè)物質(zhì)的濃度、檢測(cè)單位、被檢查單位、檢驗(yàn)員、檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)限等信息可在觸摸屏上顯示，可通過(guò)儀器內(nèi)置打印機(jī)輸出

10、連接方式：USB接口，串口，網(wǎng)口

11、數(shù)據(jù)傳輸：USB 以及網(wǎng)口（升級(jí)wifi）

12、檢測(cè)器：光電源

13、數(shù)據(jù)處理：可通過(guò)通訊端口進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總、上傳監(jiān)管平臺(tái)等。

14、項(xiàng)目拓展：支持檢測(cè)項(xiàng)目拓展功能

15、外設(shè)支持：可加裝條形碼識(shí)別模塊，可對(duì)一維和二維條碼進(jìn)行識(shí)別。

16、內(nèi)置6通道恒溫金屬浴、6計(jì)時(shí)器，可一對(duì)一進(jìn)行計(jì)時(shí)檢測(cè)。

17、每個(gè)項(xiàng)目具有獨(dú)立ID卡確保檢測(cè)安全性

三、酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）

ELISA基于抗原抗體特異性結(jié)合及酶促顯色反應(yīng)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物檢測(cè)，具備靈敏、快速、易標(biāo)準(zhǔn)化等特點(diǎn)。一個(gè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)約40個(gè)樣品，靈敏度通常較膠體金法高10倍左右，被廣泛用于獸藥殘留、真菌毒素及非法添加物的檢測(cè)。

然而，與膠體金法相比，ELISA對(duì)操作人員技術(shù)要求較高，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，通常需1.5小時(shí)。設(shè)備方面需配置酶標(biāo)儀，價(jià)格從數(shù)萬(wàn)至數(shù)十萬(wàn)元不等。試劑盒單價(jià)約500元，可檢測(cè)40樣品，平均單樣成本與膠體金試紙條相近。

深圳后王自主研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)儀基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法，定量檢測(cè)肉類(lèi)(畜禽),魚(yú)蝦(水產(chǎn)),蛋類(lèi),奶類(lèi),飼料、蜂蜜等產(chǎn)品的藥物殘留 ?？梢詸z測(cè);貝類(lèi)毒素、違禁添加物、獸藥殘留、農(nóng)藥殘留、污染物、重金屬等，全面為產(chǎn)品質(zhì)量安全保駕護(hù)航。廣泛用于部、省、市、縣、鎮(zhèn)各級(jí)農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中心；各級(jí)主管部門(mén)：農(nóng)業(yè)部門(mén)、工商部門(mén)、食品藥品監(jiān)督管理局；各地區(qū)集中屠宰中心、水產(chǎn)養(yǎng)殖基地、大型肉類(lèi)批市場(chǎng)、豬養(yǎng)殖基地；生鮮市場(chǎng)、超市；肉類(lèi)加工生產(chǎn)企業(yè)等等，并且可以連接食品安全監(jiān)控系統(tǒng)

藥物殘留檢測(cè)儀型號(hào)：HW-VD96YBA

藥物殘留檢測(cè)儀儀器參數(shù)：

1.光 源：鹵素?zé)?，自?dòng)控制，壽命可達(dá)4000h

2.光路系統(tǒng)：設(shè)備采用12通道光導(dǎo)纖維傳輸，無(wú)需校準(zhǔn)光源,同時(shí)檢測(cè)分析，快速準(zhǔn)確

可選擇1-96通道同時(shí)檢測(cè)

3.檢 測(cè) 器：進(jìn)口硅光電二極管

4.波長(zhǎng)范圍：400-1100nm

5.濾 光 片：標(biāo)配 405 、450、492、630nm,選配濾光片 410,546,578,630,690nm最多可安裝8個(gè)干涉濾光片、適應(yīng)多種項(xiàng)目檢測(cè)需要

6.讀數(shù)范圍：0-4.000Abs(450nm)

7.線性范圍：0-3.000Abs(450nm)

8.濾光片帶寬：8nm

9.分 辨 率：0.001Abs（顯示），0.0001Abs（計(jì)算）

10.準(zhǔn)確性（405nm）:±1%（0-3Abs）,±2%（3-4Abs）

11.精確性（405nm）:CV≤0.2%（0-3Abs）,CV≤1%（3-4Abs）,標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量模式

12.示值誤差：≤±0.01Abs

13.穩(wěn) 定 性：≤±0.003Abs

14.重 復(fù) 性：≤0.3%

15.振板功能：高速、中速和低速三種速度可調(diào)，時(shí)間0-999秒可調(diào)

16.顯示操作：7吋觸摸屏輸入、顯示整板信息

17.讀板速度：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)3秒/96孔，雙波長(zhǎng)6秒/96孔

18.工 作 站：計(jì)算機(jī)端酶標(biāo)儀分析軟件，具備完善的項(xiàng)目檢測(cè)、數(shù)據(jù)處理、曲線擬合、閾值判斷、質(zhì)控評(píng)價(jià)、數(shù)據(jù)管理、以及自定義報(bào)單格式等功能。

19.終點(diǎn)法、兩點(diǎn)法、動(dòng)力學(xué)，單/雙波長(zhǎng)等測(cè)試模式

20.數(shù)據(jù)輸出：COM+USB（通訊、打印機(jī)、U盤(pán)）

21.打印機(jī)：熱敏打印機(jī)選配

22.電 源：寬電壓設(shè)計(jì) AC100-240V 50/60Hz

藥物殘留檢測(cè)儀儀器特點(diǎn)：

1、專(zhuān)門(mén)的全中文操作電腦軟件，可遠(yuǎn)程控制酶標(biāo)儀的工作，各類(lèi)試劑盒的檢測(cè)和計(jì)算方法需植入電腦軟件，檢測(cè)后直接生成檢測(cè)結(jié)果，無(wú)需復(fù)制到其他計(jì)算軟件中計(jì)算，并能自動(dòng)生成符合質(zhì)量管理體系的標(biāo)準(zhǔn)格式的檢測(cè)報(bào)告,軟件設(shè)有用戶修正功能，方便個(gè)別孔結(jié)果不理想時(shí)進(jìn)行修正;

2、儀器具有自檢和校準(zhǔn)功能

3、儀器預(yù)留其他項(xiàng)目檢測(cè)程序和端口，根據(jù)日后需求可方便的自主增加檢測(cè)項(xiàng)目。日后可升級(jí)為檢測(cè)，抗生素、動(dòng)物疫病、病害肉、食品安全的綜合類(lèi)型儀器。

4、1-96個(gè)樣品同時(shí)檢查，互不干擾

5、大屏幕液晶中文顯示，人性化操作界面，讀數(shù)準(zhǔn)確、直觀、中文提示操作無(wú)需專(zhuān)業(yè)人員即可操作

6、接口方式：標(biāo)準(zhǔn)USB計(jì)算機(jī)接口可以使用RS232或者USB接口和PC機(jī)通訊，并控制儀器工作；實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)查詢(xún)、瀏覽、分析、統(tǒng)計(jì)、打印和發(fā)布信息。

7、智能化程度高：儀器可以自動(dòng)診斷系統(tǒng)故障；儀器開(kāi)機(jī)均進(jìn)行光源自檢，無(wú)需國(guó)內(nèi)同類(lèi)型儀器理由檔光塊人工調(diào)校。

8、自動(dòng)保存檢測(cè)結(jié)果，數(shù)據(jù)存儲(chǔ)量大，內(nèi)置微型熱敏打印機(jī)，可打印檢測(cè)結(jié)果。

9、儀器可存儲(chǔ)檢測(cè)數(shù)據(jù)，并能直接打印涵蓋布板信息、標(biāo)準(zhǔn)曲線、操作時(shí)間、操作人、試劑名稱(chēng)、批號(hào)、相關(guān)系數(shù)、檢測(cè)限、原始OD值、檢測(cè)結(jié)果判斷等詳細(xì)信息，可從操作人標(biāo)準(zhǔn)化操作、試劑盒及酶標(biāo)儀等方面追溯結(jié)果準(zhǔn)確性更能體現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的權(quán)威性，并利于公示

10、微機(jī)控制和儀器單獨(dú)檢測(cè)均可，操作更靈活

11、存儲(chǔ)：大容量存儲(chǔ)器，可以存儲(chǔ)千萬(wàn)組測(cè)量原始數(shù)據(jù)

12、振板功能：自動(dòng)控制，快速混勻孔內(nèi)液體，便于準(zhǔn)確測(cè)量

13、具有查詢(xún)、打印、匯總等功能，可直接輸出檢測(cè)結(jié)果，軟件終身免費(fèi)升級(jí)

14、具有對(duì)光路，機(jī)械運(yùn)動(dòng)部件等進(jìn)行自檢、校準(zhǔn)和報(bào)警功能，確保儀器處于良好的工作狀態(tài)。

15、雙波長(zhǎng)兩種測(cè)量模式功能，用戶可以根據(jù)需要選擇合適的測(cè)量模式。

16、儀器具有定性定量分析功能，可以輸出原始吸光度報(bào)告，濃度數(shù)據(jù)報(bào)告，定性分析的陰陽(yáng)性結(jié)果判定報(bào)告。

17、具有查詢(xún)、打印、匯總等功能，可直接輸出檢測(cè)結(jié)果，軟件終身免費(fèi)升級(jí)

18、默認(rèn)配置多種常用的多種藥物殘留檢測(cè)項(xiàng)目的定性定量分析檢測(cè)方法，用戶既可以按照通用的ELISA分析方法設(shè)置儀器的工作模式，也可以選擇儀器默認(rèn)的配置方式進(jìn)行操作，簡(jiǎn)化用戶的操作步驟。用戶可以將當(dāng)前設(shè)置保存為該項(xiàng)目的默認(rèn)設(shè)置，在下一次調(diào)入時(shí)不用重新設(shè)置儀器的工作方式。

19、內(nèi)建獸藥殘留國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)作為檢測(cè)結(jié)果的判定的參考依據(jù)。

四、快速篩查質(zhì)譜法

該技術(shù)為新興農(nóng)藥多殘留篩查手段，融合大氣壓原位電離和高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)，相比傳統(tǒng)色譜-質(zhì)譜方法，具有速度快、通量高、操作簡(jiǎn)便、耗材成本低等優(yōu)勢(shì)。據(jù)相關(guān)驗(yàn)證評(píng)價(jià)，某些國(guó)產(chǎn)快篩質(zhì)譜儀可實(shí)現(xiàn)對(duì)常見(jiàn)果蔬中多種農(nóng)藥殘留的高通量快速篩查，例如可同步檢測(cè)豇豆中35種、芹菜中25種、梨中28種農(nóng)藥。

但其缺點(diǎn)在于：與液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)相比，準(zhǔn)確定量能力仍存在差距；儀器價(jià)格昂貴，整機(jī)約300萬(wàn)元；單次檢測(cè)耗材成本約25元。此外設(shè)備體積較大，不便攜帶，不適合田間現(xiàn)場(chǎng)使用。